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2.2 动物细胞工程
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术
目标导航 1.结合图2-16及相关内容,归纳动物细胞培养的过程、条件及应用。2.结合图2-21,归纳通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程及应用前景。
一、动物细胞工程(阅读P44)
基础 技术手段 应用 动物细胞培养技术 动物细胞培养、体细胞核移植、细胞融合 ①深入探索并改造生物的遗传特性 ②大量培养细胞 ③单克隆抗体的制备等 二、动物细胞培养(阅读P44-46)
1.概念
从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
2.过程
动物组织块或器官单个细胞细胞悬液原代培养―→传代培养
3.相关概念
(1)细胞贴壁:悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上。
(2)接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞停止分裂增殖的现象。
(3)原代培养:指动物组织消化后的初次培养。
(4)传代培养:贴满瓶壁的细胞,出现接触抑制后,需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖的培养过程。
4.培养条件
(1)无菌、无毒的环境:培养液中添加一定量的抗生素,并定期更换培养液,以清除代谢产物,防止对细胞自身造成危害。
(2)营养
(3)温度和pH
(4)气体环境
5.应用
(1)生产生物制品:如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。
(2)应用于基因工程:动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞。
(3)应用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性。
(4)用于生理、病理、药理等方面的研究,如筛选抗癌药物等。
三、动物体细胞核移植技术和克隆动物(阅读P47-50)
1.概念
将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,最终发育为动物个体。
2.分类
包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植,其中胚胎细胞核移植较易成功。
3.过程
4.应用前景
(1)加速家畜遗传改良进程,促进优良畜群繁育。
(2)保护濒危物种。
(3)转基因克隆动物可作为生物反应器,生产许多医用蛋白。
(4)转基因克隆动物细胞、组织和器官可作为异种移植的供体。
(5)人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化,形成相应的组织、器官后,可以用于组织器官的移植。
(6)研究胚胎发育及衰老过程,追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。
5.存在问题
(1)成功率非常低(低/高)。
(2)绝大多数克隆动物还存在健康问题。
(3)克隆动物食品的安全性存在争议。
判断正误:
(1)动物细胞培养时,需要对细胞进行一次脱分化处理和两次胰蛋白酶处理。( )
(2)恒温条件下进行动物细胞培养,细胞周期持续时间长短不随细胞培养进程而改变。( )
(3)动物细胞培养技术可用于检测有毒物质、构建人造皮肤、大量生产药物蛋白。( )
(4)为了防止培养过程中发生微生物污染,应将培养箱抽成真空以消毒、灭菌。( )
(5)动物细胞核移植的原理是动物细胞核的全能性。( )
(6)哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。( )
(7)动物细胞在培养的过程中一些细胞会发生遗传物质的变化。( )
(8)目前使用的或冷冻保存的细胞通常是10代以内的细胞,以保持正常的二倍体核型。( )
(9)在动物细胞的培养过程中,培养液中可以不加入血清和血浆等物质。( )
答案 (1)× (2)× (3)√ (4)× (5)√ (6)√ (7)√ (8)√ (9)×
一、动物细胞培养
1.动物细胞培养过程分析
(1)过程:
(2)贴壁生长现象及接触抑制现象
①贴壁生长:动物细胞在液体培养基中悬浮生长一段时间之后,大部分细胞会贴附在培养瓶壁上生长。
②接触抑制:细胞进行有丝分裂,数目增加到表面相互接触时,停止分裂增殖,出现接触抑制现象。
(3)原代培养和传代培养
①原代培养:动物组织消化后的初次培养。
②传代培养:原代培养过程中,贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶培养,让细胞继续增殖。
2.动物细胞培养与植物组织培养的比较
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 生物学原理 细胞的全能性 细胞增殖 培养基性质 固体 液体 培养基成分 蔗糖、氨基酸、水、矿物质、生长素、细胞分裂素、琼脂等 葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、水、血清、血浆等 培养结果 新的植株或组织 大量新细胞或细胞产物 应用 ①快速繁殖
②培育无病毒植株
③细胞产物的工厂化生产
④制作人工种子 ①生产病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等
②检测有毒物质
③生理、病理、药理研究 培养条件 无菌、适宜的温度和pH 取材 植物器官、组织或细胞 动物早期胚胎、幼龄动物的器官或组织 培养对象 植物器官、组织或细胞 分散的单个细胞 过程 脱分化、再分化 原代培养、传代培养 细
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