急性毒性分析报告.ppt

四、近似致死剂量法 主要用于非啮齿动物的试验。常用Beagel犬或猴。 1、估计可能的致死范围。 2、按50%递增法，设计10-20个剂量的 序列表。 3、在剂量的序列表中找出可能致死剂 量范围。 五、固定剂量法 （Fixed-dose procedure) 试验不以死亡为观察终点，而以明显的毒性体征为评价指标。 用5、50、500和2000 mg/kg4个固定剂量中的一个做初试剂量，单次给药。 首选雌性动物进行试验。 六、其他方法 1、上下法（阶梯法、序贯法） 2、累积剂量设计法（金字塔法） 上下法（Up-and-Down Procedure） UDP由限度试验和主试验组成。 限度试验分为2000mg/kg剂量水平和5000mg/kg剂量水平，用于受试物毒性可能较小的情况。两种剂量的限度试验具体步骤有细微差别，但最多仅用5只动物。 上 下 法 主试验是一个预先设计的给药程序，在此程序中，每次给药一只动物，若该动物存活，第二只动物给予高一级剂量，若第一只动物死亡或出现濒死状态，第二只动物给予低一级剂量。在对每只给药动物仔细观察48小时后，可以决定是否对下一只动物给药，以及给药剂量。当出现在最高剂量下有连续3只动物存活，或在6只动物中有5只连续发生在高一级剂量死亡、在低一级剂量生存的生死转换等情况时，可以停止试验。根据终止时所有动物的状态，用最大可能性法计算LD50值 用于该方法的LD50计算软件可从以下地址免费下载： /oppfead1/harmonization/ F系列抗癌活性物的急性毒性试验研究 研究背景 以G－四链体结构为靶点的端粒酶抑制策略，成为抗肿瘤药物的研究热点。然而目前国内外对于此类药物的毒性研究甚少，缺乏有效的G－四链体稳定剂安全评价体系，限制了其临床应用。 吲哚喹啉（去甲基白叶藤碱）衍生物F318系列化合物 和凡等. 参与抗癌新药F318体外代谢的大鼠细胞色素P450酶, 中国新药杂志 2007, 16（10）, 765-769. 研究目的 评价受试物的急性毒性，估算LD50及其可信限，进行大致的毒性分级。 观察毒性表现，为毒性作用机制的研究提供线索。 为受试物的筛选及结构修饰提供依据。 为建立有效的G－四链体稳定剂安全评价体系做出基本准备。 研究框架 研究方法 上下法（Up-and-Down Procedure, UDP） 试验动物：昆明小鼠，雌性 剂量级数因子：3.2 1.75 5.5 17.5 55 175 550 2000 （单位：mg/kg） 起始剂量 研究方法 上下法（Up-and-Down Procedure, UDP） 停止标准 1、最高剂量下连续3只动物存活 2、任意连续6只试验动物中有5只连续发生存活/死亡转换 3、第一只动物发生转换之后至少有4只动物进入试验，并且其LD50估算值的范围超出临界值（2.5倍） 研究方法 上下法（Up-and-Down Procedure, UDP） 观察与记录： 中毒症状，症状出现、消失时间，死亡情况，大体解剖 数据处理： AOT 425(Version1.0) 研究结果 试验序号 给药剂量（mg/kg） 死亡情况 LD50(95%CI)(mg/kg) 1 55 O 2 138.9 X 3 55 X 4 17.5 O 55(14.51-286) 5 55 O 6 175 X 表1 FM318小鼠经腹腔注射给药的急性毒性结果及LD50计算 注：O=生存，X=死亡 研究结果 试验序号 中毒症状 死亡情况 大体解剖所见 1 无 存活 无异常 2 竖毛,行动迟缓,闭眼,蜷缩 24h后发现死亡,尸体腹面向下,伸展 腹腔有少量黄色液体，肝、胃、肠颜色变黄，其他无异常 3 竖毛,腹式呼吸,运动不协调 48h后发现死亡,尸体腹面向上 无异常 4 无 存活 无异常 5 无 存活 无异常 6 大小便失禁,震颤,站立不稳 24h后发现死亡,尸体腹面向上,蜷缩 无异常 表2 FM318小鼠经腹腔注射给药的急性毒性反应症状 研究结果 试验序号 给药剂量（mg/kg） 死亡情况 LD50(95%CI)(mg/kg) 1 17．5 O 2 55 O 3 175 X 4 55 O 103(55-175) 5 175 X 6 55 O 7 175 X 表3 F318成盐化合物小鼠经静脉注射给药的急性毒性结果及LD50计算 注：O=生存，X=死亡 研究结果 试验序号 中毒症状 死亡情况 大体解剖所见 1 无 存活