C反应蛋白及临床应用教案分析.ppt

C-反应蛋白及临床应用 Protein Structure CRP结构 C反应蛋白的生理和生化  在细胞因子IL-6家族诱导下，CRP在肝中合 成迅速。 正常合成率为 l～10 mg／d，急性炎症时每 天合成超过 lg/d。 在急性相反应高峰时肝大量合成蛋白，其中 20％是合成CRP。 当IL-6刺激物缺乏时，在 2～4 h内合成率降 至正常。 循环中CRP半衰期约19h，但一旦它与配体结 合，可快速的被清除。 肝外合成对血清水平影响作用很小。 CRP的生物学功能 CRP的生物学功能-机理 结合坏死的内源性物质 在钙离子存在的情况下，CRP能结合坏死的内源性物质和效应细胞, 当正常的脂质双层结构被破坏致使内部磷脂暴露时，CRP可发生与宿主细胞的结合。 在系统性红斑狼疮的鼠模型中，注射CRP可改善SLE的状况。 人CRP基因的多态性导致的低基础水平表达增加了发生系统性狼疮的风险。 CRP量的减少可能与SLE发病机理有关。 CRP量的减少使结合的细胞碎片减少。 CRP的生物学功能-机理 结合外源性物质 细菌、真菌、寄生虫中的细胞壁磷酸胆碱。 CRP具有保护机体抗细菌感染的能力。 CRP 保护机体抵抗致命性的细菌脂多糖和各种炎症介子的能力。 CRP的生物学功能-机理 结合配体的CRP激活下列生物系统，导致配体的消除： CRP对补体系统的激活. CRP结合IgGFcR，增强自然杀伤细胞的活性。 CRP的调理性质，调理即刺激细胞吞噬作用。 CRP和血小板激活因子(PAF)结合　抑制PAF刺激的血小板聚集。 CRP的生物学功能-机理 CRP具有多效性的作用。 当抑制干扰素的合成时 ，CRP可诱导IL-1受体拮抗剂而增加抗炎细胞因子IL-10的释放 . CRP也可诱导炎症反应。 CRP向上-调节内皮细胞粘附分子的表达，刺激许多细胞释放IL-8， 增加血浆纤维蛋白酶原催化剂抑制剂-1的表达和活性、增加IL-1, IL-6, IL-18, 和肿瘤坏死因子的释放. CRP诱导或抑制炎症反应依赖于环境。 CRP功能 识别和启动靶效应细胞及其产物并将其从组织中清除。 吞噬溶解入侵微生物。 急性相蛋白CRP合成的生物调控 CRP基因位于1号染色体短臂，只有一个内含子，其分离编码信号肽的区域。 肝脏CRP合成的调节主要发生在转录阶段。由IL-6诱导，IL-1可增加此作用。 CRP启动子最近区为STAT3 和 Rel 蛋白的结合部位。 这些因子的相互作用增加DNA 结合C/EBP家属成员的稳定性，从而有效地诱导了CRP基因的表达。 神经元细胞、动脉硬化斑块、单核细胞和淋巴细胞也可以合成CRP。在这些部位的调节机制还不清楚。 修饰的CRP(m-CRP) -Modified CRP 目前认为m-CRP是原CRP的单体。 与天然CRP不同,表现在分子大小,溶解度,抗原性,带电荷数等方面的差别. m-CRP具抗菌作用。 m-CRP具有强大地诱发炎症的作用。 检测方法 方　法　　　　　　灵敏度　　　　　参考献 试管内沉淀试验　　- 　　　　　JExpMed1930;52∶561 毛细管内沉淀试验　　10～20mg/L　　　AmJMed1950;8∶445 改良平板双扩散法　　10～20mg/L　　　IntArchAllergy1962 改良琼脂柱扩散法　　3.0mg/L　　　　　ProcSocExpBiol1955 改良单扩散法　　　　1.0mg/L　　　　 ActaPatholMicrobiolScand 琼脂糖凝胶电泳法　　1.0mg/L　　　　　ClinChimActa1969 放射电免疫扩散法　　10μg/L　　　　　JClinLabInvest1973 补体结合试验　　　　0.6mg/L　　　　　ProcSocExpBiol1954 胶乳凝集试验　　　　1.0mg/L　　　　　Nature(London)1961 高敏乳胶增强浊度 0.35mg/ml Dade Germany2000 荧光抗体法 — Nature(London)1961 放射免疫测定法 3μg/L JLabClinMed1976 CRP检测方法 -　免疫沉淀试验 检测CRP原始方法. 将兔抗CRP血清吸入毛细管内。 把它浸入被测血浆或血清内,因毛细管虹吸作用被吸入,与抗CRP血清形成接触界面。 这种方法较粗糙,取得结果时间较长,也不太正确可靠. CRP检测方法 -　免疫浊度法 可溶性