1000140药物_第十一章抗生素_1002要点.ppt

第十一章 抗生素类药物分析 第一节 概述 特点：化学纯度较低, 同系物多，异构体多，降解物多，稳定性差。 鉴别方法：生物学法，理化方法 特殊检查项目：异常毒性、热源或细菌内毒素、降压物质、无菌，组分分析 ，聚合物等。 第三节 氨基糖苷类抗生素 这类抗生素的化学结构都是以碱性环已多元醇为苷元，与氨基缩合而成的苷，故称为氨基糖苷类抗生素。 主要有链霉素、庆大霉素、卡那霉素、新霉素及巴龙霉素、硫酸奈替米星、硫酸西索米星、硫酸依替米星等 它们的抗菌谱和化学性质都有共同之处。 麦芽酚（Maltol）反应 这类抗生素分子有四个环构成，故统称为四环素类（tetracyclines）抗生素。 一、化学结构与性质 四、含量测定 四环素类抗生素的含量测定，目前各国药典多采用高效液相色谱法。 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱（pH值适应范围大于8.0）；0.1 mol/L草酸铵溶液-二甲基甲酰胺-0.2 mol/L磷酸氢二铵溶液（68?27? 5），用氨试液调节pH值至8.3为流动相；流速1ml/min；柱温35℃；检测波长为280nm。 结果：供试品溶液如显杂质斑点，其颜色 与标准品溶液（3）所显主斑点相比较，不得更深（1%）， 其他杂质与标准品溶液（1）所显主斑点相比较，均不得更深（1%）， 如有一点超过，应不深于标准品溶液（2）的主斑点（2%）。 注：奈替米星是由西索米星经化学衍生而成的半合成抗生素，因此在奈替米星成品中有可能残留西索米星，需进行控制。 样 西 对1 对2 供试品溶液：150mg / mL； 标准液（1） 1.5mg / mL； 标准液（2） 3mg / mL； 标准液（3） 1.44mg西索米星/mL 3、庆大霉素C组分测定 庆大霉素C1、C2、C1a对微生物的活性无明显差异，但其毒副作用和耐药性有差异，导致各组分的多少影响产品的效价和临床疗效。因此各国药典均规定控制各组分的相对百分含量。 庆大霉素无紫外吸收，当采用HPLC-紫外检测器检测时，需进行衍生化处理。由于其具有强极性和水溶性，为获得理想的色谱结果，可采用离子对色谱法，以庚烷磺酸钠为反离子。 如USP（29）利用庆大霉素C组分结构中的氨基与邻苯二醛（OPA）、巯基醋酸在pH10.4的硼酸盐缓冲液中反应，生成1-烷基-2-烷基硫代异吲哚衍生物，在330nm波长处有强吸收。 ChP和BP曾采用USP同样的方法测定庆大霉素C组分，但在现版药典中分别改用了蒸发光散射检测器和电化学检测器。 庆大霉素 OPA 巯基醋酸 异吲哚衍生物 ChP（2005）采用蒸发光散射检测器检测 色谱条件：　 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（pH值范围0.8～8.0）； 0.2mol/L三氟醋酸-甲醇（92：8）为流动相，流速0.6ml/min； 蒸发光散射检测器检测 系统适用性试验 分别称取庆大霉素和小诺霉素标准品各适量，用流动相制成每1ml中各含0.2mg的溶液，取20?l注入液相色谱仪，记录色谱图. C组分的出峰顺序从第二个主峰计，依次为庆大霉素C1a、C2、小诺霉素、C2a、C1； C2、小诺霉素和C2a峰之间的分离度应符合要求； 连续进样的小诺霉素峰面积的相对标准偏差应不大于2.0%。 测定法 取小诺霉素标准品适量，精密称定，分别用流动相制成每1ml中约含小诺霉素0.2mg、0.5mg和1.0mg的溶液作为标准品溶液（1）、（2）、（3）。取上述三种溶液各20?l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，计算标准品溶液浓度的对数值与相应的主峰面积对数值的回归方程，相关系数（r）应不小于0.99； lg0.2 lg0.5 lg1.0 lgA r≥0.99 另取本品适量，精密称定，用流动相制成每1ml中约含庆大霉素2.5mg的溶液，同法测定，用回归方程计算供试品中对应各组分的量（Xcx），并根据所得的各组分的量（Xcx）按下面公式计算出各组分的含量。 式中Cx 为庆大霉素各组分的含量； C1应为25%～50%，C1a应为15%～40%，C2a+C2应为20%～50%。 第四节 四环素类抗生素 化学结构： 四环素类抗生素，可以看作四骈苯或萘骈萘的衍生物。 性质 1、酸碱性（具两性） 2、旋光性（有多个手性碳） 3、紫外吸收和荧光（刚性平面结构） 4、与金属离子形成配位化合物 5、不稳定性 四环素类抗生素对各种氧化剂（包括空气中氧在内）、酸、碱都是不稳定的，易发生差向异构化、降解等反应。 二、鉴别试验 1、浓硫酸反应 四环素类抗生素遇硫酸立即产生各种颜色 2、三氯化铁反应 分子结构中具酚羟基，遇三氯化铁试液即呈色 3、薄层色谱法 采用硅藻土作载体，为了获得较好的分离，在粘合剂中加有聚乙二醇400