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组织培养的技术条件 组织培养的步骤 1.培养基的准备:培养基是指人工配制的含有营养物质供培养物生长分化的介质。通常含无机营养物质(大量元素和微量元素)、碳源(1%-4%蔗糖)、生长调节剂(2,4-D或NAA、KT或6-BA)以及有机附加物(维生素、甘氨酸)等几类物质组成。 2.消毒灭菌(材料、培养基、用具等) 3.接种 4.培养 继代 5.移栽 细胞生长 微纤丝沉积方向决定细胞的形状 激素影响微管在质膜内侧的排列方向 细胞分化是发育生物学中 的一核心问题。 细胞程序性死亡programmed cell death PCD 植物单个细胞内在的衰老程序被激活产生的细胞衰老过程。 三 植物程序性细胞死亡 导管分子细胞在分化的最终阶段发生PCD,细胞核破裂,染色质降解,细胞质消失,导致细胞死亡 概念 PCD的调控 低氧 乙烯 生物胁迫 图22.18 氧气缺乏时玉米(Zea mayL.)根皮层中通气组织的发育。 在氧气充足的条件(A)或72小时缺氧的条件下(B)玉米根系横切面的电子显微镜图片显示缺氧根系皮层通气组织的形成。皮下组织和内皮层仍保持完整,中央皮层细胞死亡空腔隙形成圆柱形的导气室。 PCD是植物抵御病原微生物的侵染的重要策略之一。 这种对病原微生物的侵染发生的快速死亡反应——超敏反应(hypersensitive response, HR)。 活性氧应该是诱导PCD的一个信号。 第二节 植物细胞的生长和分化 第三节 植物的生长和分化 第四节 环境对植物生长的影响 第五节 植物的运动 第一节 植物生长和分化、发育的概念 植物顶端分生组织每经过一轮细胞分裂,就形成一批新的细胞,原有的细胞离开顶端的距离就会增加,随着这些细胞伸长生长的加速,它们离开顶端的距离渐远,离开的速度也加大。所以,从这个角度来看,植物的生长可以被看作某一细胞远离顶端的位移过程。 在茎或根上某一点做一个标记,那么它与茎尖端或根尖端之间的距离将随着时间的推移而增大。如果将该距离随时间变化的关系做成一个函数图,就是标记点(组织单元)的“生长轨迹”曲线。 如果以组织单元的生长速率为纵坐标,以它们和茎(根)尖顶端的距离为横坐标作图,便得到植物的生长速率曲线 * 植物的生长发育的基本单位都是细胞。 所有细胞的分裂、生长和分化三个过程的总和,构成了植物的生长发育。 植物是一个多细胞有机体,细胞之间有紧密的连接,细胞的生理活动必须与周围细胞保持协调的相互关系。正是由于这种相互影响作用的存在,每个细胞在器官和组织中的位置,反过来也影响甚至决定其分化方向和生理功能。 胞间连丝是相邻细胞保持物质和信息联系的桥梁植物的一些重要的发育调节蛋白能通过胞间连丝进行胞间移动。 * 这种通过胞间连丝构成的细胞间共质体联系可以随着细胞生长分化的进程发生变化 。 由一些特殊的信号诱导,伴随着一系列特殊基因的表达,导致细胞产生生化和形态上的特征性变化,包括细胞核收缩、核DNA片断化降解等,最终导致细胞死亡。 * 由一些特殊的信号诱导,伴随着一系列特殊基因的表达,导致细胞产生生化和形态上的特征性变化,包括细胞核收缩、核DNA片断化降解等,最终导致细胞死亡。 * 植物细胞全能性 totipotency 植物的每一个生活细胞都有全套的遗传信息,在适当的条件下,能表达出来,长成一个新的,与母体相似的完整植株,叫植物细胞全能性。 植物体 分离 灭菌 外植体、接种培养 脱分化 细胞分裂形成愈伤组织 再分化 幼根、幼芽 小植株 脱分化 再分化 叶片 子叶 子叶节 茎段 胚 (1)培养基的配制 ① 无机营养 包括大量元素和微量元素 ② 碳源 蔗糖(1% ~ 4%)。 ③ 维生素 B1(硫胺素) ,烟酸、B6(吡哆 醇)、肌醇 ④ 激素 2,4-D,NAA;KT,6-BA等 ⑤ 有机附加物,如甘氨酸、酵母汁、椰 子乳等,以促进细胞的分化。 琼脂,0.6%~1% (2)无菌条件 外植体:氯化汞、H2O2、次氯酸钙、 70%酒精等 培养基:高温高压灭菌,超净工作台 (3)培养条件 光照 ,25~27℃ 另一种是大多数高等植物的多细胞器官中,细胞的扩大是由整个细胞壁的大部分区域一起扩展,呈弥散型 。 一种是顶端生长,如根毛,花粉管的细胞扩大仅在细胞的一端产生; 细胞生长方向 激素 微纤丝取向 微管 终端复合体
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