shrna阻断型pi3k信号传导通路对人胃癌sgc7901细胞的影响.pdf

shRNA阻断ⅡI型P13K信号传导通路对人胃癌SGC7901细胞的影响 中文摘要 shRNA阻断III型P13K信号传导通路 对人胃癌SGC7901细胞的影响 中文摘要 mRNA表达的抑制效 (ShortHairpinRNA，shRNA)重组质粒，观察其对靶基因P13KC3 果，并筛选出一条具有高效抑制作用的shRNA序列；②利用RNA干扰技术特异性阻断 影响。 h、48 胞，利用shRNA干扰技术阻断III型P13K信号传导通路，分别在质粒转染第24h、 72 h后镜下观察胃癌细胞形态学变化；③在质粒转染48h后收集细胞总I埘A，采用实 时荧光定量PCR技术检测目的基因P13KC3mRNA表达值的变化，并筛选出一条具有 胃癌SGC7901细胞自噬相关基因MAP—LC3 表达值的变化。 24 h后镜下观察见细胞出现胞体皱缩、细胞间隙增宽，48h后细胞出现明显皱缩，部 分细胞脱落，72h后见较多细胞脱落；③质粒转染胃癌SGC7901细胞48h后行实时荧 光定量PCR技术检测各组P13KC3mRNA表达值的变化，各shRNA干扰组的胃癌细胞 PI3KC3 mRNA表达值 shRNA阻断m型P13K信号传导通路对人胃癌SGC7901细胞的影响 中文摘要 癌SGC7901细胞内自噬特异性蛋白基因MAP—LC3mRNA表达水平下调至对照组的 mRNA的表达水平分别上调至对照组的 28．02％_-I：2．65％；凋亡相关基因p53和PUMA 80．24％l士4．17％(P0．05)。 475。62％8．36％和1 导通路后，明显下调了胃癌SGC7901细胞自噬基因LC3 mRNA的表达 特异性阻断III型P13K信号传导通路后，使凋亡相关基因p53、PUMA 癌细胞凋亡的发生。 关键词：III型P13K；shRNA；自噬； 凋亡 作 者：范小庆 指导老师：邢春根教授 II E虢ctsofshRNAInhibitClassIIIP13KonHumaBGastricCancerSGC7901Cells Abstract Effectsof shRNAInhibitClassⅢP13KonHuman aslGastriclCancerencerSGC790C7 11 ells Abstract constructthe Short ective：①To Obj plasmidcontainingHairpin which totheClassIIIP13K ofhumancancerSGC7901 targeting signalingpathway gastric the effectto and the