牛人工授精技术精要.ppt

牛人工授精技术 广西武宣金泰丰农业科技有限公司 人工授精的概念 种畜配种：自然交配、人工授精 人工授精是指利用器械采取公畜的精液，经过适当的检查和处理，再用器械把精液输送到母畜生殖道的适当部位，使之受孕的配种方法。 人工授精的发展 试验阶段： 1780年意大利生理学专家司拜伦谨尼（Spallanzani）第一次进行狗的人工授精。20世纪初对马试验成功。 实用阶段：在20世纪30年代形成了一套较完整的操作方法。40～60年代，欧洲多数国家，北美、大洋洲国家及日本人工授精已相当普及。 冷冻精液阶段： 　　出现：1949年英国波芝（Polge）对鸡精液冷冻成功。 　　发展：1950年英国的史密斯（Smith）和波芝研究开发了牛精液冷冻保存技术。1960年后冷冻精液的人工授精技术广泛展开。我国的人工授精技术始于50年代（猪），但精液冷冻技术70年代才得以推广。 人工授精的意义 充分发挥优秀种公畜的种用价值和配种效能，加快品种改良步伐。 提高母畜的受胎率。 防止疾病特别是传染病的传播。 克服因家畜体形悬殊造成的配种困难。 冷冻精液的应用使种畜的利用不受时间和空间的限制。 是发展繁殖新技术的一项基础措施。 人工授精技术程序 采精 精液品质检查 精液稀释 精液保存 输精 采精 采精的准备 采精方法 采精频率 采精的准备 场地：宽敞、明亮、安静、清结，有消毒设施和保护栏。 台畜：活台畜、假台畜。 假阴道：安装调试后具备适宜的温度、压力、和润滑度。 公畜：具备良好的繁殖体况；经过训练；采精前进行充分的性准备。 采精操作 公畜的采精频率 公牛：每周两天，每天两次。 公猪、马：宜隔日一次，如果连续两天采精，要休息2-3天。 公羊：每天数次，连续数周。 精液的品质检查 外观检查 精子活力检查 精子密度检查 精子畸形率检查 其他检查 精液的外观检查 精液量 精液色泽 精液气味 云雾状 精子活力检查 平板压片法 悬滴法 精子密度检查 估测法 血细胞计计数法 精子密度仪测定 估测法 密：在整个视野中，精子间空隙不明显，看不清单个精子运动。10亿／ml。 中：在整个视野中，精子间空隙明显，可容纳1—2个精子，3—10亿／ml 稀：在整个视野中，精子间空隙较大，可容纳数个精子，1—3亿／ml。 (二)血细胞计数法： ?在显微镜看清血细胞计数板上的方格： 稀释精液：用移液管吸取精液50微升置于小试管中，再吸取3%NaCI溶液450或950微升与精液混匀。 镜检：在400倍的显微镜下找出具有代表性的五个中方格，四角和中间一个或对角线五个，用计数器计数其中的精子数。 计算：1毫升原精液精子数=5*5*10*1000*稀释倍数 各种家畜精子密度比较 畸形率的检查 畸形精子：头部畸形、颈部畸形、尾部畸形 精子畸形率：精液中畸形精子占总精子数的百分率。 优质精液精子畸形率应小于：牛18%、羊15%、猪18%、马12% 畸形率的检查 取一滴原精液，均匀的涂在载玻片上，干燥1～2分钟。 用96%以上酒精固定2～3分钟。 用美蓝或墨水染色1～2分钟。 用蒸馏水轻轻冲洗。 干燥后镜检， 其他检查 顶体异常率 精子生存时间和生存指数的测定 PH测定 美蓝褪色试验 果糖分解试验 精子耗氧量测定 顶体异常率的检查 取鲜精适量，在37℃下用生理盐水稀释。 涂片，干燥，用5%福尔马林固定10分钟。 姬姆萨液染色1.5～2小时。 干燥后用树脂封闭，制成标本。 400～600倍镜检，数500～1000个精子，计算项体异常率。 精子生存时间和生存指数的测定 精子生存时间：指精子在某温度下在体外的总的生存时间。 生存指数：将精液在某温度下，每隔8～12小时检查一次精子活力，直至无活动精子为止，相邻两次检查的平均活力与间隔时间的积之和为生存指数。 PH测定 正常精液PH：　牛、羊　6.5～6.9、猪、马　7.4～7.5　 同种精液PH偏低的，品质较好，PH偏高的受精率、生活力和保存效果都显著降低。 美蓝褪色试验 精液稀释 稀释的目的 稀释液的成分及作用 稀释液的配制方法 稀释倍数的确定 稀释方法 稀释的目的 大精液容量，增加了一次采精量的可配母畜数。 延长精子存活时间。 有利于精液的保存和运输。 稀释液的成分及作用 稀释剂：单纯扩大容量的等渗液。0.9%NaCl、5%葡萄糖。 营养剂：主要提供营养，以补充精子在代谢过程中消耗营养。 （1）奶类：奶粉(脱脂、速溶)10—12%；鲜奶经消毒加入10—20ml。 （2）卵黄，通常加入20%。 （3）糖类，3%葡萄糖，11%蔗糖。 保护剂：主要保护精子免受各种不良外界环境因素的危害。 　　（1）非电解质或弱电解质：降低精液电解质浓度，常用糖类、氨基乙酸。 　　（2）缓冲物质：维持精液的PH，常用柠檬酸盐、酒石酸钾钠、磷酸二氢钾和三