抗鸡热应激添加剂粗粉和超微粉粒度、溶出率比较.docVIP

抗鸡热应激添加剂粗粉和超微粉粒度、溶出率比较 　　摘要：目的：比较抗鸡热应激中药添加剂粗粉和超微粉的粒度分布、溶出率和抗热效果。方法：采用激光粒度分析技术，测定添加剂粒度和粒度分布；以人工肠液为溶剂，测定添加剂总浸出物溶出率；用小鼠高温致死试验和高温耐缺氧试验，测定小鼠高温条件下的死亡率和耐缺氧时间。结果：超微粉粒度在15.801μm以上的比率极显著低于粗粉（P0.01），其粒径几乎都在20μm以下，并且粒径分布集中，粗粉粒径分布分散；超微粉的总浸出物溶出率较粗粉组显著提高；超微粉组小鼠高温下的死亡率比粗粉组低（P0.05）。结论：添加剂超微化后破坏了植物细胞壁、颗粒均一，溶出率增高，抗热应激效果增强。 　　关键词：超微粉添加剂；粗粉；粒度分布；溶出率；抗热效果 　　中图分类号：TB 　　文献标识码：A 　　文章编号：1672.3198（2013）03.0187.02 　　由江汉大学动物营养免疫课题组配制的抗鸡热应激中药添加剂由黄芪、甘草、夏枯草、芦根、生石膏、薄荷六位组分构成，其中黄芪含黄芪多糖、皂甙，甘草含甘草葡聚糖、甘草酸类，能显著增强动物免疫力，薄荷有消炎和抗菌作用；夏枯草能降血压，对痢疾杆菌、霍乱弧菌、大肠杆菌等有抑制作用；生石膏有清热泻火、镇静、降血压、增强动物细胞及体液免疫功能；芦根能清热生津，祛痰排脓 。超微粉中草药较传统中药散剂具有有效成分溶出率高、药物用量少、见效快、使用方便节约中药资源等应用优势。为了提高添加剂的使用效果，课题组对添加剂进行了超微粉碎。本试验比较了添加剂粗粉和超微粉的粒度分布、溶出率和抗热效果，为添加剂的使用提供试验依据。 　　1材料与方法 　　1.1抗鸡热应激中草药添加剂粗粉和超微粉 　　抗鸡热应激中草药添加剂由江汉大学动物营养免疫课题组配制，针对蛋鸡热症，选用黄芪、甘草、夏枯草、芦根、生石膏、薄荷（购于武汉九州通医药集团股份有限公司）六味中药原料按一定比例混合成复方剂，经粗粉粉碎机粉碎，过80目筛，制成粗粉，再用超微粉球磨粉碎机制成超微粉。 　　1.2试验动物 　　40只雌性健康昆明种杂交小白鼠，体重相近（25g±0.8），购于江汉大学试验动物中心。 　　1.3仪器 　　2MZP1.5微粉球磨机，武汉迈科微米中药技术有限公司；RISE-2002激光粒度分析仪，济南润之科技有限公司；SHA-B水浴恒温振荡器，上海汗诺仪器有限公司；TDL-40B 低速离心机，上海嘉鹏科技有限公司；DHG9070A电热鼓风干燥箱、上海雷韵试验仪器制造有限公司；LRH-400-GSH人工气候箱，广东省医疗器械厂。 　　1.4人工肠液的配制 　　模仿家禽肠道环境（家禽十二指肠PH值6.08、空肠PH值6.34），用Na2HPO4和NaH2PO4配成PH为6.2的PB缓冲液备用（配方为：0.2mol/L Na2HPO481.5mL +0.2mol/L NaH2PO418.5mL）； 　　1.5方法 　　1.5.1粒度和粒度分布测定 　　激光粒度分析仪经预热、基准测试后，启动超声，分别将1g左右的添加剂粗粉、超微粉放入以蒸馏水为分散剂的样品池中，搅拌分散，超声停止后，启动循环泵，当数据稳定后，从软件窗口读取和存储粒度数据图和粒度数据表。测试参数设置：分散剂蒸馏水、超声时间4分钟、搅拌转速3000转/分钟、循环泵速5000转/分钟、样品折射率2.60、介质折射率为1.33。 　　1.5.2添加剂总浸出物溶出率的测定 　　用电子天平准确称取干燥添加剂超微粉4份，每份5g；干燥添加剂粗粉4份，每份5g，分别放入8个锥形瓶中，分别加入人工肠液各50mL，用干净薄膜封口，置于40℃恒温振荡器中，每份分别在3h、6h提取两次，以3000rpm离心10min；称量待用滤纸和平皿重量，将离心液用滤纸过滤，过滤完毕后，将滤纸连同药渣一同放入平皿中，置烘箱内，于50-60℃过夜；待药渣干透后称重，按下列公式计算溶出率。 　　溶出率（%）=[（滤纸重+平皿重+5）-（滤纸重+平皿重+药渣重）]/5×100%； 　　1.5.3抗热效果试验 　　以小鼠为动物模型，通过下述试验比较添加剂粗粉和超微粉的抗热应激效果。 　　（1）高温致死试验：30只小鼠随机分为粗粉组和超微粉组，每5只饲养于同一小鼠笼内。粗粉组每天每只灌胃0.18mL/10g中草药添加剂粗粉水提物（水提物按常规法制成，1mL相当于粗粉0.44克），超微粉组每天每只灌胃0.18mL/10g中草药添加剂超微粉水提物（水提物按常规法制成，1mL相当于超微粉0.44克），饲养期为21天，饲养室温度控制在20℃±1℃。21天两组组同时进行热暴露，30只小鼠置于LRH-400-GSH人工气候箱内，将温、湿度分别设置为46℃、80%，观察30分钟