卤代荧光素及其似结构化合物的荧光、磷光特性及与生物大分子作用的研究.pdf

!兰堡登 —————————_“___——_——————”—————___—__—●————————————_w__—————一 一 一一——— 中文摘要 第一章：本毒练述7棱酸搽铮约释类，掇铮与核羧耀互搀耀瓣方式，褥究撵镑与援酸佟藤静 手段，j三l及棱酸探针的应用：并综述了缀臼质光谱探针的种类以及常用的研究蛋白质与小 分子探针作魍的光谱方法。 第二章：考察了二碘荧光素和四溴荧光秦的流体荧光和戴体基质璧温磷光特性。发现这两 种染料都可以产生滚体荧光拳1霾髂基葳塞温磷毙，对影晾宅嚣j发光强度兹备转落素，包括 滤纸基质类颦。碰条件，醴及点样对辘和稳定性等进行了详细的研究。测得了一些光谱参 数如：荧光和磷光偏振值。磷光寿命等。并建立了这两种荧光素的流体荧光和固体基质室 瀑臻毙分辑法。 第墨章：用荧光光谱法和固体基质室温磷光光谱法研究了翊澳荧光萦与DNA熬提互倦耀。 实骏表明：DNA会後靼滚荧光累的荧始和固体萋质室温磷光强度增强。胡离子猝灭变验表 明，DNA的存在使得阴离子对四澳荧光素的猝戴程度增犬，这说明四澳荧光素与DNA发 生了沟楗键套。壤叛实验表褐，在DNA翳莓在下，疆洼荧毙紊弱磷毙攘摄穰增螺，逸袭弱 因滇荧光素嵌插在DNA碱基对之间。可能是四溴荧光紊中的二苯辩吡喃环嵌入了DNA的 碱麟对之间，其衡镶的苯环可能键合攫DNA的沟槽中。DNA的存程使乙醇对靼漠荧龙囊 荧党强度静影响减小，离子强度的大小辔会影响鞠澳荧光豢与DNA的辐互干#用。 第姆章：本文考察了强氯疆淡荧光素弱滚露荧必帮固体基震室涅璇毙特蛙，磐对影螭蒸发 光静条件如：pH条件．固体蒸餍，重原予效应，烘烤条件锋．进行了详细考察。结果表明， 四氯四溴荧光素的荧光激发和发射波长金别为540nm／560nm磷池的激发和发射波长走 556nm／699nm，发鸯|筵子长波熬。毙谱法掰究霆鬣西凑荧兔索与DNA静檩互作用翁实验表 喁：DNA的存在会使暇氯四浚茨光素的旋光和固体基质室温磷光强度发生变化。阴离子猝 灭实验表明，四氯四潦荧光素可以嵌插程DNA的碱基对之阕。受DNA驰僚护作用，使褥 戮离子对露鬣秘澳荧光素舾猝张程度减小。荧光德撮实验袭磺，在DNA的存在下，翻氯四 溴荧光素的偏擐值增加．这也支持四氯四溴荧光素嵌插在DNA碱基对之间的实验结果。离 子强度豹丈，j、会荔嚷嚣燕霾溴荧宠嘉彝DNA瓣樱歪锋焉。臻Scatchard方疆求褥二者静结 合常数为2×10气／mol，结台谯点数为0．16。 幕敷牵：】拜i焚竞光谱法研究了强碘荧光索与牛盘淹自蛋自的结合反成。测褥该反应驰结合 常数为5．7X 10．L·m01．结台数n=O．86。并探．【寸了它们的相互作用机理，结果表明四碘荧 光絮生要鞋簸拳捧甩奠与牛盘瀵囊虽白糖互修尾。霹蛙，磺究表瘸，牛盘溥蠡虽鑫瓣蓐 生堡查兰!坚星曼主堡塞生兰堡丝茎一一一—— 在会增强四碘荧光素的发光。且强度的变化在一定范围内与牛血清白蛋白的浓度成正比， 以此为基础在pH=8．64的条件下建立了涓定牛血清白蛋白的方法·该法的线性范围为8．0x 104 mol，L．9．0X mol／L。 10—7 lomoLL．精密度为3．4％，检出限9．88X 第六章：本文考察了丽丝胺罗丹明RB-200的流体荧光和固体基质室温磷光特性，并对影 响其发光的条件如；pH条件，固体基质，重原子效应，烘烤条件等。进行了详细考察。结 果表明丽丝胺罗丹明RB-200的荧光激发和发射波长分别为568nndS96nm，磷光的激发和发 射波长为570nm／702nm。光谱法研究藤丝胺罗丹明RB-200与DNA相互作用的实验表明： DNA的存在会使赢丝胺罗丹明RB-200的吸收光谱产生明显的减色效应，荧光猝灭。阴离 子猝灭实验表明，嚣丝胺罗丹明怂-2∞与DNA作用后受DNA的保护作用，使得阴离予 对丽丝胺罗丹明RB-200的猝灭程度减小。这说明熏丝胺罗丹明RB．200可以嵌插在DNA 的碱基对之间。偏振实验表明，在DNA的存在下，露丝胺罗丹明RB．200的偏振值增加