分解纤维素的微生物的分离与计数.docVIP

专题2　 课题3：分解纤维素的微生物的分离导学案 1．简述纤维素酶的种类及作用从土壤中分离出分解纤维素的微生物讨论微生物的应用价值。 一、纤维素与纤维素酶 1．纤维素的化学组成： 三种元素，是一种 糖。 2．纤维素的分布： 是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。 3．纤维素酶的作用：纤维素酶是一种 ，一般认为它至少包括三种组分，即 酶、 酶 酶，前两种酶使纤维素分解成 ，第三种酶将纤维二糖分解成 。 二、纤维素分解菌的筛选 1．筛选方法： 染色法。 2．筛选原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成 ，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以 为中心的透明圈，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。 三、试验设计 土壤中纤维素分解菌的分离的实验方案:分解纤维素的微生物的分离的试验流程 、 、 、 、 1．土壤取样：采集土样时，应选择富含 的环境。 2．选择培养： 阅读资料二“选择培养基”，回答以下三个问题： 〖思考1〗纤维素分解菌选择培养基属于 培养基，原因是什么？。 〖思考2〗培养基选择作用机制是什么？ 〖思考3〗若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是什么？ (1)目的：增加纤维素分解菌的 ，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。 (2)制备选择培养基：参照课本旁栏中的比例配制。 (3)选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在 上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变 。也可重复选择培养。 梯度稀释： 依次将培养液稀释101～107倍。思考是如何操作的？ 4. 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 5. 刚果红染色法：挑选产生 的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。 刚果红染色法：常用的刚果红染色法有两种即 。 阅读资料三“刚果红染色法”，填表比较两种染色法的各自的优缺点 是 、 。 阅读资料三“刚果红染色法”，填表比较两种染色法的各自的优缺点： 〖思考5〗为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ 四：结果分析与评价 四．课题延伸 1.为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行 实验，纤维素酶的发酵方法有 发酵和 发酵。 2.纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的 含量进行定量测定。 思考：⑴此流程图与样品的稀释和稀释液的取样培养流程图有何异同？ ⑵为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？ ⑶将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？ ◇◇ 典例精析 【例1】纤维素酶可以将下列哪种物质分解…………( ) A．牛肉片 B．鱼片 C．滤纸条 D．塑料条 【例2】在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是…………… ( ) A．分解尿素的细菌 B．硝化细菌 C．分解纤维素的细菌 D．乳酸菌 【例3】本实验关于选择培养目的叙述正确的是…( ) A．可以增加纤维素分解菌的浓度 B．可以减少纤维素分解菌的浓度 C．所用培养基是固体培养基 D．所用培养基是平板培养基 1．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是 ( ) A、未接种的选择培养基 B、未接种的牛肉高蛋白胨培养基 C、接种了的牛肉高蛋白胨培养基 D、接种了的选择培养基 2．从土壤中分离获得某种微生物的步骤是( ) ①土壤取样 ②梯度稀释 ③选择培养 ④涂布培养 ⑤筛选菌株 A．①②③④⑤