黄酮类化合物的提取和分离.ppt

药物化学演讲稿 09药物化学 张坤 本人近期通过查阅一些文献以及阅读中药化学课本，总结中药当中重要结构之一的黄酮类的提取分离，如有不足之处请大家多多指教！ 黄酮类化合物 Flavonoids 黄酮类化合物简要概述 黄酮类化合物是广泛存在于自然界的一大类化合物。由于这类化合物呈黄色或淡黄色，且分子中亦多含有酮基因此被成为黄酮。 黄酮类化合物是中药中一类中药的有效成分，具有多方面的生物活性，非常值得科研工作者深入研究 黄酮类化合物的提取和分离 原理：黄酮类化合物的溶解性和酸性 相似相溶与酸碱理论 提取： 苷元：极性小的溶剂，如氯仿、乙醚、乙酸乙酯等 回流提取 苷及极性大的苷元： 用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、醇-水加热提取 极性稍大的甙元一般指：羟基黄酮、双黄酮、 橙酮、查尔酮 多糖苷类：一般用沸水提取 黄酮类化合物的提取和分离 溶剂萃取法（系统分离法） 碱提酸沉法 炭粉吸附法 黄酮类化合物的提取和分离 黄酮类化合物的提取和分离 原理：酚羟基与碱成盐，溶于水；加酸后析出 碱： 常用Ca(OH)2，即石灰乳(石灰水) 优点 A：使含酚羟基化合物成盐溶解 B：使含羧基杂质（果胶、粘液质、蛋白质等） 形成沉淀 注意 a：提取时，碱液浓度不宜过高。 b：加酸酸化时，酸性也不宜过强。 应用：芦丁和槲皮素的提取、分离和鉴定 黄酮类化合物的提取和分离 原理：活性炭吸附黄酮苷类化合物 用途：主要用于含量较高的黄酮苷类的精制 操作：植物的甲醇提取物中，分次加入活性炭， 搅拌，静置，定性检查上清液无黄酮反应时为止。 过滤，收集活性炭，依次用沸水、沸甲醇、7%酚/水、 15%酚/醇溶剂进行梯度洗脱，对各部分洗脱液进行定 性检查。 大部分黄酮苷类可以用7%酚/水洗下。 黄酮类化合物的提取和分离 极性 氢键 分子大小（量） 酸性 特殊结构 黄酮类化合物的提取和分离 硅胶是一种高活性吸附材料，其化学分子式为mSiO2·nH2O 应用范围： 主要分离小极性和中等极性的化合物，应用最为广泛。 异黄酮、二氢黄酮（醇）、高度甲基化（乙酰化）的黄 、 酮及黄酮醇 多羟基黄酮、黄酮醇及其苷类：硅胶加水去活化 吸附规律： 极性大吸附能力强 e g ： A 苷元 B 二糖苷 C 单糖苷 Rf：A C B 黄酮类化合物的提取和分离 原理：氢键吸附（作用） 洗脱规律：（先—后） 母核上羟基增加，洗脱顺序递减 羟基数目相同时，有缔合羟基 无缔合羟基 苷元相同：三糖苷 双糖苷 单糖苷 苷元 不同类型黄酮类化合物的洗脱先后顺序为： 异黄酮＞二氢黄酮醇＞黄酮＞黄酮醇。 分子中芳香程度高、共轭双键多，则聚酰胺对其的吸附力强，故难于洗脱。 应用范围：适合各种类型的黄酮类化合物，包括苷、苷元、查耳酮及二氢黄酮 聚酰胺“双重色谱”原理 正相与反相层析 硅胶 固定相（硅醇）极性 流动相（醇）极性时为正相 聚酰胺 固定相（聚酰胺脂肪链）极性 流动相（醇水）极性时为反相 黄酮类化合物的提取和分离 常用型号：Sephadex-G和Sephadex-LH20 原理：吸附作用和分子筛 对游离黄酮，主要是吸附作用, 吸附程度取决于游离酚羟基的数目，苷元的羟基数目越多，越难洗脱。 对黄酮苷，主要是分子筛原理, 洗脱时按分子量由大到小先后洗脱下来。 常用洗脱剂： 碱性水溶液（0.1mol/L NH4OH），盐水溶液(0.05mol/L NaCl) 醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水，乙醇等。 其它溶剂：含水丙酮、甲醇-氯仿(凝胶会膨胀， 体积变大)。 黄酮类化合物在Sephadex-LH20(甲醇)上的Ve/Vo 黄酮类化合物的提取和分离 规律： 苷元的羟基数越多，Ve/Vo越大，越难以洗脱。 吸附作用 苷的分子量越大, 其上联结糖的数目越多,Ve/Vo 越小, 容易洗脱。 分子筛原理 苷比苷元先洗脱。 黄酮类化合物的提取和分离 原理： 黄酮类化合物具有酸性、且不同数目和不同位置的酚羟基的酸性强弱不同 适用范围：适用于分离酸性强弱不同的黄酮苷元 黄酮类化合物的提取和分离 黄酮类化合物的提取和分离 原理：利用分子中某些特定官能团性质进行分离 具有邻二酚羟基的成分，用醋酸铅沉淀