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鉴定类实验 还原性糖、脂肪、蛋白质、淀粉的鉴定 一、实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 三．实验材料 思考4．做可溶性还原性糖鉴定实验应选择什么样的实验材料？为什么？ 思考5．做脂肪的鉴定实验应选择什么样的实验材料？． 思考6．做蛋白质的鉴定实验应选择什么样的实验材料？ 四、实验试剂 斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精液，碘液、蒸馏水。   思考7．斐林试剂与双缩脲试剂相同吗？为什么？ 不同；虽然它们的成份都是NaOH溶液和CuSO4溶液配制而成，但它们的溶液浓度不同，使用的原理不同（斐林试剂实质是新配制的Cu ( OH ) 2与还原性糖发生反应，而双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+与肽键发生反应），使用的方法也不同。 思考8．上述的酒精溶液起作用？ 洗去浮色 思考9．为什么苹果或梨组织液必须临时制备？ 思考10．实验中应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂，为什么？ 思考11．实验中能否将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测？为什么？ 思考12．还原糖溶液检测过程中出现的颜色变化过程是怎样的？ 2、脂肪检测和观察的操作方法： 方法一：向待测组织液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液，观察样液被染色的情况； 方法二：取材→切片→制片→观察 思考13．为什么切片要尽可能薄些？ 思考14．制片过程中为什么要洗去浮色？ 思考15．制片过程中为什么要用吸水纸吸去花生子叶周围的酒精？ 思考16．制片过程中为什么在盖上盖玻片前要滴加蒸馏水？ 3、蛋白质检测和观察的操作方法： 制备组织样液（浸泡、去皮研磨、过滤）→加样液约2ml于试管中→加入双缩脲试剂A，摇匀→再加入双缩脲试剂B液3~4滴，摇匀→观察颜色变化。 思考18．检测时向试管内加双缩脲试剂B液4滴，为什么CuSO4溶液不能多加？ 六、应用： 例题1：安徽阜阳劣质奶粉事件曝光后，有关部门对收缴的劣质奶粉进行了化验，发现不法商人为了降低成本，在其中添加了大量糖类物质，让婴儿喜欢吃却无法得到足够的蛋白质营养。请回答： (1) 长期以劣质奶粉为主食的婴儿会成为“大头娃娃”，这是由于缺乏蛋白质导致血浆渗透压下降，血浆中的大量水分进入 造成的。 (2) 有些劣质奶粉中含有大量还原糖，如果用斐林试剂鉴定，则该试剂与待测样液在试管中混合均匀后，还必须经过 处理；预计试管内混合液的颜色变化是 。 (3) 如果用双缩脲试剂鉴定劣质奶粉是否含有蛋白质，那么，将待测样液注入试管之后，注入试剂的顺序应该是