人胚胎干细胞向胰岛样细胞分化过程中miRNA表达动态变化.pdfVIP

2011年北京医学会内分泌暨糖尿病学术年会论文汇编 机制密切相关，并经过实时定量PCR验证与芯片结果一致：这两种基因在高糖状态的基 因启动子区甲基化水平高于血糖正常状态，且治疗达标后甲基化水平能够恢复，与高糖 下的病理机制相关。 研究结论基线血清血R．375和血R．124的表达水平与2型糖尿病患者的格列苯脲疗 关键词2型糖尿病，格列苯脲，IIlicroRNAs，DNA甲基化 人胚胎干细胞向胰岛样细胞分化过程中 mZRNA表达的动态变化 魏蕊 刘国强杨进侯文芳 高美娟 陈贵安洪天配 北京大学第三医院内分泌科和临床干细胞研究中心北京(100191) 目的将人胚胎干细胞(hES细胞)诱导分化为胰岛样细胞，并研究该分化过程中微 小RNAs(IIlicroRNAs，血RNAs)的表达及其变化趋势。 方法采用改良的定型内胚层途径诱导方案，将hES细胞经定型内胚层和胰腺前体细 胞阶段诱导分化为胰岛样细胞；利用相差显微镜、RT-PCR、实时定量PCR及免疫荧光染 色等方法对诱导分化不同阶段的细胞进行鉴定；采用茎环结构的实时定量PCR方法分析诱 导分化各阶段细胞中胰岛特异性血RNAs的表达，并与成人胰岛进行比较。 结果 (1)通过定型内胚层途径诱导方案可以将llES细胞诱导分化为胰岛样细胞。 分化细胞在悬浮状态下可聚集形成球形，类似胰岛的结构，且双硫腙(DTZ)染色阳性。 荧光结果显示，分化细胞PDXl、胰岛素、C一肽及胰多肽染色阳性。(2)该诱导分化方案 模拟了胰岛体内胚胎发育过程。实时定量PCR分析显示，hES细胞特异性标志物(Oct4、 标志物【肝细胞核因子1p(HNFIp)、删a】，胰腺前体细胞特异性标志物【神经元素．3 素、生长抑素、葡萄糖转运子2(GLUr2)等】的表达及其变化趋势与体内胰岛胚胎发育 的进程类似。(3)该体外诱导分化方案所获得的胰岛样细胞是尚不成熟的胰岛细胞。胰岛 素、胰高糖素、胰多肽等多种激素在分化细胞中染色阳性，且分布并无差异，提示分化细 ·112· 2011年北京医学会内分泌暨糖尿病学术年会论文汇编 特异性标志物的表达均远低于正常成人胰岛的水平。分化细胞的高糖刺激的胰岛素分泌反 性miRNA在hES细胞和分化细胞中的表达水平较成人胰岛明显低。 结论通过定型内胚层途径诱导方案可以将hES细胞诱导分化为胰岛样细胞，该诱导 方案模拟了体内胚胎胰岛的发育过程。然而，通过该诱导分化方案所获得的胰岛样细胞成 可能参与调控胰岛B细胞分化和成熟的过程。 关键词胚胎干细胞；胰岛；微小RNA 伴或不伴视网膜病变的早期糖尿病 肾病患者肾功能及尿蛋白质组的差异 马靖杨光燃 贾育梅杨金奎 首都医科大学附属北京同仁医院内分泌科 目的研究长病程2型糖尿病患者尿自蛋白水平相同、糖尿病视网膜病变程度不同情 况下肾小球率过滤间的差异，分析糖尿病视网膜病变程度不同的微量白蛋白尿患者尿液蛋 白质质谱，寻找差异蛋白，为识别糖尿病。肾病早期诊断的尿液标志物提供线索。 方法选取2009年2月至2010年9月于首都医科大学附属北京同仁医院内分泌科住 有入组患者均进行体格检查、空腹收集血液标本，留取夜间8小时尿液测定尿白蛋白排泄 率，单视野免散瞳眼底照相、眼底组专业医师进行直接检眼镜眼底检查以及放射性同位素 测定肾小球滤过率。根据尿白蛋白排泄率水平分为正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和大 量白蛋白尿组。各组间分别比较不同视网膜病变程度时肾小球滤过率情况。分别从NDR 男6例，女4例)，(PDR组男8例，女2例)，提取尿标本中的蛋白质，酶解为肽段混合 Protcomic Pipeline软件在Swiss．Prot 生物信息学数据。 结果1．正常白蛋白尿组NDR与PDR两亚组患者之间肾小球滤过率无统计学差异， ·113。