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五个微生物EPSPS基因对草甘膦抗性的评价与鉴定 EValuationandidenti6cation fbr瓶VeEPSPS Of resistanCe gIyphOsate from encodinggenes microorgaIIism 营高鼓越，劐免军。，陆讳s，秣敏s，互鼙莫势 (1中鬻农监夭学农学毒生物技术学院匏京l∞193；2中萄农业辩学院谗耪辞学研究耩托京 lO∞8l；3中鹭农建辩学院生物技术辑究所北京l∞081) 播要：杂草是危害玉米生产的一个重要因素。通过转基因技术可以将外源基因整合鲻作物基蹒组 中并赋予转基因作物抗除草荆性状。目前抗除草剂转基因作物主要是国外公司开发的含5一磷酸烯 醇式丙酮酸莽草酸一3一磷酸合酶(EpsPs)的转基因氨米、大豆等。Epsps是微生物和植物体内莽 高蟪基越麓予籍基毽傩物研究。 关键词：EpSps；草曹膦；烟草；抗幢 因都能使ER2799在禽革甘膦的M9培养基中恢复嫩长，而对照菌株不能正常生长。含有不同 现出比其它4个基因更好的生长状况，表明AM79一EPsPs在微生物中的草甘膦抗性最离。 为了评价五个EPs腭基因在植物中的草甘膦挠性，我们将5个基因构建到植物表达载体 p￡A鹾嚣lA330lC8醚V35s囊动子懿下游。为使曩的蛋囱更好地定位于叶绿俸孛获得受赢戆草彗膦撬 性，在E裕裕基因前绷一时绿体定位信号肽。逶过时盘法转化获得转基因烟草栋系，并对Tl代转 基因株系进行革曹膦撬性分析。生长在温室孛一个月大小的转基因烟莘喷施12班的草曹膦 基因的烟草生长良好，生物量可以达到0．29，每5株，而转其它四个EPsPS基因的烟草都受到不同 ◇。l辱国、娆一E筠玛羚。黼囝，暖显的低予转A醚79一嚣黔黔的燧草。植物俸肉莽草酸含鬟酶变化是其响 应草甘膦胁追的一个黧要指标。莽萃簸含量越低表骥箕耐受草甘膦的能力越强，爱之则表明耐受性 较差。当对五个转E醛羚基因烟草喷施49昆赣89琵的R蛐n如p惹，转A麓79一掰S筠基因烟草的莽 草酸含量跑其他转基因株系低，表鹗转A辩79一EPsPs基因烟草中的莽草酸途径没有受到草甘膦明髭 抑制，可以耐受较高浓度的草甘膦胁迫。 以上结果表明AM79一EPsPS在大肠杆菌和烟草中比其它4个基因都有更高的草甘膦抗性。将此 基因转入玉米获得抗革甘膦转基因玉米的工作正在进行中。下一步将进一步突变该熬因，提高其草 甘膦抗性，获碍更有应用价值的基因。 ★通讯作者萎一嫩越：删雾@e猫，娃魄c鼗 一24～