细菌人工染色体介导猪促卵泡激素在转基因小鼠体内表达.pdfVIP

·扬州· 第十六次全国动物遗传育种学术讨论会论文集 ·261· 细菌人工染色体介导的 猪促罗19泡激素在转基因小鼠体内的表达 毕明君1，童佳1，畅 飞1，王美丽2，郑敏2，李宁1 (1．中国农业大学，农业生物技术国家重点实验室，北京 100193； 2．北京济普霖生物技术有限公司，北京 100193) 引育 hormone，FSH)是动物垂体前叶嗜碱性细胞合成和分泌的一种糖蛋白生殖 促卵泡激素(Follicle-stimulating 激素，它和促黄体素一起在调节性腺功能中扮演重要角色。在雌性动物中，促卵泡激素主要促进子宫内膜生长、 排卵和刺激多卵泡发育。研究表明胚邶基因是猪产仔数的主效基因。因此我们通过转基因小鼠模型这一强有利 的工具来探讨露Ⅳ基因在生殖方面的功能。为了避开传统研究方法的弊端，我们利用FSH-BAC来构建转基因 小鼠模型，获得外源促卵泡激素生理分泌量的转基因小鼠家系，以研究猪胚H在垂体中特异表达对雌性小鼠生 殖的影响。 材料与方法 本实验采用昆明白小鼠品系，利用猪触和硒邓基因信息设计引物筛选猪基因组BAC文库获得携带俗日 ANOVAortwo—w吖ANO— FSH激素及相关生殖激素含量；对转基因小鼠进行传代并利用SPSS软件(one—way VA)进行生物统计遗传分析。 结果 BACl83011，两者不仅含有基因的完整序列，而且含有远端调控序列。通过原核显微共注射线性片段的方法制作转 家系。猪FSH基因在mRNA水平上表达具有很强的组织特异性即只在小鼠垂体中表达。转基因小鼠血清ELISA 和同窝非转基因小鼠血清发现小鼠内源促卵泡激素和睾酮水平没有显著差异，而促黄体素和17B-雌二醇的含量 有显著下降(P0．05)。选择F1代阳性小鼠与同窝阴性小鼠各15只进行传代至少一年并经生物统计分析产仔数。 在母鼠相同周龄时转基因鼠比同窝非转基因鼠平均产仔数高2只左右，但在母鼠30周龄时．两者差异最大。 达3只(P0．05)。转基因鼠和非转基因鼠相比，体重、卵巢和子宫的重量没有显著差异。 讨论与结论 手段在转基因小鼠垂体内成功表达具有生物活性的猪促卵泡激素。并检测了其生理功能。转基因小鼠和同窝非转 基因小鼠内源促卵泡激素水平没有显著差异。因此我们推定转基因小鼠产仔数增加可能是由于转入的猪促卵泡激 索引起的．但需要进一步做卵泡计数进行验证。 关量词：细菌人工染色体(BAC)；猪促卵泡激素；转基因小鼠 致谢：本研究受国家转基因生物新品种培育重大专项资助。