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任务2 培养基的制备技术 学以致用——养细菌 一、认识 化能自养菌氧化硫杆菌的培养基 粉末状硫 10g KH2PO4 4g MgSO4 0.5g CaCl2 0.5g (NH4)2SO4 0.4g FeSO4 0.01g 水 1000mL(自来水即可) 培养一种大肠杆菌的培养基配方如下: 葡萄糖 0.5g K2HPO4 1g MgSO4 0.2g NaCl 5g NH4H2PO4 0.4g 水 1000mL 大肠杆菌的营养类型? 化能异养型。 培养基的基本要求? 至少有一种有机物,实验室中通常是葡萄糖 二、培养基的分类 天然培养基 合成培养基 半合成培养基 (三)按照培养用途分: 基础培养基 加富培养基 选择培养基 鉴别培养基 生产用培养基 抑制剂: 青霉素(抑制 G+ 细菌) 分离G- 细菌 抗生素 氯霉素,链霉素(抑制细 菌 分离酵母、霉菌 染料 胆盐:抑制G+ 分离G- 孟加拉红:抑制 分离 用于选择性的物理因素有:温度,氧气,pH值,渗透压等 目的:增殖少数 手段:“投其所好” 混合样品 富集培养基 成为 中劣势菌 选择培养基 优势菌 目的:抑制多数菌 手段:“取其所抗” 三、培养基应具备的条件 具有合适的营养物质,满足微生物对六大营养物质的需求; 应始终保持在微生物发育的pH值范围内; 任何培养基一旦配成,须立即灭菌后才能使用。 价格低廉 货源充足 运输方便 无毒环保 总 结 ◆6大类营养物质: ◆4大类营养类型: ◆常用的培养基分类别包括: ◆培养基应具备的3个条件: ◆配制培养基的5大原则: ☆加入CaCO3 “备用碱”: CO32 – HCO3 – H2CO3 CO2+H2O +H+ –H– +H+ –H– ☆磷酸缓冲液:pH值从6.4~7.2之间 K2HPO4+HCl KH2PO4+KCl KH2PO4+KOH K2HPO4+H2O 2. pH 3.O2浓度的调节 由微生物与氧气的关系形成了三类微生物: 专性好氧性微生物 专性厌氧性微生物 兼性厌氧的微生物 实践对策: 专性好氧性微生物:空气提供氧气、工业上采用通气装置。 专性厌氧性微生物:采用理化方法除氧、向培养体系加 入还原剂(半胱氨酸、巯基乙酸钠、Na2S和抗坏血酸) (五)经济节约 * * ———人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物所需的混合营养基质。 提问:其中各组分作用是什么? 空气中的CO2 能源 碳源是什么? 氮源 盐 也可补加一部分碳酸钠。 培养基类型 合成培养基 半合成培养 天然培养基 基本培养基 富集培养基 鉴别培养基 固体培养基 液体培养基 半固体培养基 按成分不同划分 按用途划分 按物理形态划分 (一)按成分划分: (一)按照培养基成分来源分: a. 天然培养基:利用化学成分还不清楚或不稳定的天然有机物制成的培养基。 优点:原料来源充足、营养丰富、经济简便 缺点:成分和含量
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