中国野生葡萄白粉菌诱导cDNA文库中抗病基因的筛选.pdfVIP

( ) 第 36 卷 　第 2 期 西北农林科技大学学报 自然科学版 Vol . 36 No . 2 2008 年 2 月 J ournal of Nort hwest A F U niver sit y (Nat . Sci . Ed . ) Feb . 2008 中国野生葡萄白粉菌诱导 cD NA 文库中 抗病基因的筛选 张军科 ,王 　静 ,王跃进 ,张朝红 ,徐 　炎 ( 西北农林科技大学 园艺学院;农业部西北园艺植物种质资源与遗传改良重点开放实验室 ,陕西 杨凌 7 12 100) [摘 　要] 　【目的】从中国野生华东葡萄白河 351 经白粉菌接种诱导后叶片所构建的 cDN A 文库中 ,筛选抗病 相关基因。【方法】根据植物抗病基因保守序列 NB S 位点设计特异引物 ,对葡萄白粉病接种诱导后的环化 cDN A 文 库进行菌落 PCR 筛选 ,从随机挑选的大量菌落中筛选出 82 个 PCR 阳性菌落 ,提取阳性菌落的质粒进一步进行 PCR 检测确认 ,对确认的 36 个阳性质粒插入片段进行了测序 。【结果】测序结果和序列生物信息学分析结果均表明 ,有 3 ( ) 个基因序列与 Genbank 中的已知序列有较高的同源性 ,其中 1 个基因序列与葡萄抗 白粉病基因 D T66 1587 . 1 序列 ( ) 同源性达 99 % , 另外 2 个基 因序列与水分胁迫下葡萄特异表达基 因 D T03 1657 . 1 和葡 萄抗皮尔斯病基 因 (CF202948 . 1) 的同源性分别为 89 %和 96 % 。【结论】初步推测获得的 3 个基因均为抗性相关基因。 [ 关键词] 　中国野生葡萄 ;cDN A 基因;文库筛选 ;抗病基因 [ 中图分类号] 　S663 . 1 [文献标识码] 　A [文章编号] 　167 19387 (2008) 020 11905 Re si st ance gene s scre ening in Uncinular nec ator induce d cDNA libr ary of Chine se wild grap e Z HAN G J unke ,WAN G J ing ,WAN G Yuej in ,Z HAN G Chaohon g ,XU Yan ( Col leg e of H ort icul t ure , N ort hw es t A F Uni vers ity ; Key L aboratory of N ort hw es t H ort icul t u re