化学发光法测定SOD活性的干扰因素及消除方法.pdfVIP

第 18 卷第 4 期 　　　　　　　　　　　　　　　 分 析 科 学 学 报 2002 年 8 月 .18 　 .4 　　　　　　　　　　 . 　2002 Vol No JOURNAL OF ANALYTICAL SCIENCE Aug 文章编号:1006 6144 (2002 ) 040321 03 化学发光法测定 SOD 活性的干扰因素及消除方法 徐　靖　　赵兰华　　　　　　　　宋功武　　 (郧阳医学院化学教研室, 湖北十堰,442000 )( 湖北大学分析测试中心, 武汉,430062 ) 摘　要: 采用黄嘌呤黄嘌呤氧化酶及邻苯三酚自氧化作为酶和非酶超氧阴离子 自由 基发生体系, 以鲁米诺为发光剂, 通过 SOD 对发光的抑制率以测定 SOD 活性。采用 加热样品使 SOD 失活, 测得样品发光抑制率本底值, 扣除本底值以消除干扰。在两种 体系中测得结果有高度一致性, 样品中 活性分别为 170 ±9.3 和 165 ± SOD U mL 2 0 。本法用于测定生物制剂中 活性, 不需有机溶剂萃取, 可有效地消除 U mL SOD 干扰, 是一种实用、可靠测定 SOD 活性的方法。 关键词: 超氧化物歧化酶; 化学发光; 黄酮类; 抗坏血酸; 超氧阴离子 中图分类号: O 657.39; Q 55　　　文献标识码:A ( ) [1] 超氧化物歧化酶 SOD , EC 1.15.1.1 是一种存在于需氧生物体内的金属酶 。它能特异地催化超 氧阴离子 自由基( · - ) 的自发歧化, 因此, 被认为具有防御活性氧毒性、预防衰老及防治肿瘤和炎症等 O 2 功能[2,3] 。化学发光法具有灵敏度高、专一性好、测定快速等优点, 被广泛用于测定各种生物样品中的 活性[1,4,5] 。但是由于各种酶或非酶体系所产生的· - 不仅能被 所消除, 同时也能被黄酮类化 SOD O 2 SOD 合物和浓度较高的维生素 、 等消除[6,7] 。因此, 在测定含这些物质浓度较大的植物及生物制剂样品 C E 时, 往往受到很强的干扰。用萃取法处理操作繁杂、费时, 有机溶剂易造成环境污染。因此, 有必要寻求 更为方便有效地消除干扰方法。 · - ( [4] [5] ) 本文报道用两种不同的 O 2 发生体系 黄嘌呤黄嘌呤氧化酶体系 和邻苯三酚 自氧化体系 化 学发光法检测保健饮品三勒浆口服液中SOD 活性, 探讨了干扰因素及消除方法。 1　实验部分 1.1 　仪器与试剂 1250 型发光光度计( , ) 用于发光强度测定。 LKB Wallac Finland ( ) ( 鲁米诺 公司, 用 0.1 溶解后配成 1