小鼠口腔与胃途径对精制人白细胞α型干扰素的吸收研究.pdfVIP

3．小鼠口腔和胃途径对精制人白细胞a型干扰素的吸收研究 周如娇饶海林吴永林邓 杰何凯钱汶光’ 卫生部成都生物制品研究所 摘要小鼠口腔和胃途径对精制人白细胞Ⅸ型干扰素吸收研究表明：口腔 合服是人白细胞q型干扰素吸收的一个重要途径，胃途径不吸收人白细胞Ⅱ型 干扰素．口腔含服人白细胞Ⅱ型干扰素的小鼠血清用微量细胞病变抑制法和 ELISA法均可检测到人a型干扰素，且小鼠血清中干扰素活性可被人口型干扰 素抗体完全中和，证明小鼠血清中检测到的干扰素是经口腔途径吸收的人白细 胞Ⅱ型干扰素．胃途径给予人白细胞c【型干扰素的小鼠血清则未检测到人0【型 干扰素．该研究结果支持精制人白细胞Ⅱ型干扰素新剂型一一口含片的研制开 发． 关键词精制人白细胞q型干扰素；口腔途径；胃途径；吸收 精制人白细胞n型干扰素是临床上广泛应用的一种抗病毒、抗肿瘤和免疫 调节因子。近十多年的临床应用证明其注射剂型疗效好、副作用小。在此基础 上研制开发精制人白细胞11型干扰素新剂型一一口含片，由于其用药途径地改 变，特在动物小鼠体内进行了口腔和胃途径对精制人白细胞n型干扰素的吸收 研究。 一、材料和方法 (一)材料 精制从白细胞n型干扰索冻干制剂：卫生部成都生物制品研究所96030i 批制剂，300万IO／安瓶。 雄性Balb／c小鼠：卫生部成都生物制品研究所实验动物室提供。 Wish细胞：卫生部成都生物制品研究所干扰素室传代细胞。 VSV病毒：卫生部成都生物制品研究所干扰素保存病毒。 干扰素标准品：中国药品生物制品检定所分发，国家标准品——Lot03／04， 12000IU／支 免抗人白细胞n型干扰素抗体：卫生部成都生物制品研究所干扰素室自制 (960305批)。 人a型干扰素单克隆抗体：安微安科生物高技术有限公司赠。 HumanELISAIFN a试剂盒：Endogen．Inc．USA，编号003799。 121 (二)方法 粉末型干扰素：冻干精制人a型干扰素加辅料制成。 液体型干扰素：冻干精制人白细胞n型干扰素加白哩白生理盐水制成。 实验小鼠分为四组，每组l2只小鼠。 6 口腔含服途径组(粉末型)每只小鼠5分钟内口腔含服粉末型干扰素6×10 国际单位。 6 口腔含服途径组(液体型)每只小鼠5分钟内口腔含服液体型干扰素6×10 国际单位。 胃途径组每只小鼠灌胃方：式给予液体型干扰素6×106国际单位。 对照组小鼠在5分钟内口腔含服自旦自生理盐水。 实验小鼠血清样品的采集：小鼠在服药前(0小时)及服药后1小时、2 小时、8小时采集血样。每组小鼠在每一个时间点收集三只小鼠血样(摘眼球 取血)混合在一起，4℃保存，分离所得血清样品置一20℃冻存。 人白细胞a型干扰素活性检测采用Wish一一VSV系统微量细胞病变抑制 法‘“。 人a型干扰素蛋白含量检测采用美国Endogen公司人。型干扰素生物素一 一亲和素酶标免疫法。 中和实验：实验小鼠血清中加入免抗人臼细胞n型干扰素抗体和人c，型干 扰素单克隆抗体37℃作用18小时后检测小鼠血清中干扰素活性。 二、结果 (一)各实验组小鼠每个时间点血清样品中干扰素活性，见附表一。 表一 小鼠血清样品中干扰素活性(IUIFN／m1) 依据表一结果绘制粉末型和液体型干扰素口腔含服途径吸收曲线，见图 1200 1000 800 600 ^一{nI一掣烬联嚣：I： 400 200 O 0 l 2 3 4 5 6 7 8