妇科止带胶囊微生物限度检查方法验证.docVIP

贵州宏奇药业有限公司 妇科止带胶囊 微生物限度检查方法验证 验 证 人：顾荣跃 验证单位：贵州宏奇药业有限公司 验证日期：2014年10月 原始资料保存处：贵州宏奇药业有限公司 联 系 人：李天权 联系电话：0858-5315027转210 贵州宏奇药业有限公司 妇科止带胶囊微生物限度检查方法 【处方】椿皮 726g 五味子 128g 黄柏 726g 龟板 484g 茯苓 726g 阿胶 240g 山药 726g 【制法】10倍量水煎煮二次，每次2小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.10（60℃），加乙醇使含醇量为50%，搅拌混匀，静置12小时，滤过。黄柏用8倍量85%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，合并提取液，滤过。茯苓用8倍量60%乙醇，五味子、山药用8倍量45%乙醇照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法（中国药典2005版附录I O）进行渗漉。以上各液分别回收乙醇并浓缩成相对密度为1.28（60℃）的稠膏。龟板用水浸洗除去肉屑，加10倍量水煎煮二次，每次6小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成胶状稠膏；滤渣晾干，粉碎成粗粉，用8倍量10%醋酸浸渍48小时，滤过，滤液蒸干，得醋酸浸出物。阿胶用蛤粉炒后粉碎成细粉，过筛，与上述各稠膏及醋酸浸出物混匀，80℃减压干燥，加适量淀粉调整总量至460g，粉碎，过筛，装入胶囊，制成1000粒，即得 【用法】口服，一次2～3粒，一日2～3次 【规格】每粒装0.46g 【微生物限度检查】 细菌: 取供试品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，充分混匀，作为1:10供试液。取1:10供试液5ml加入pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至10ml，充分混匀，作为1:20供试液。取1:20供试液1ml分别注入5个平皿中，每皿0.2ml（平行操作两份）。按中国药典2010年版一部附录XⅢC微生物限度检查法中培养基稀释法检查。 霉菌及酵母菌: 取1:10供试液1ml分别注入5个平皿中，每皿0.2ml（平行操作两份）。按中国药典2010年版一部附录XⅢC微生物限度检查法培养基稀释法检查。 控制菌检查 大肠埃希菌：取1:10的供试液按中国药典2010年版一部附录ⅩⅢ C微生物限度检查法规定的相应方法检验。 沙门氏菌：取供试品10g按中国药典2010年版一部附录ⅩⅢ C微生物限度检查法规定的相应方法检验。 妇科止带胶囊 微生物限度检查方法验证报告 一、检验目的：确认对供试品进行微生物限度检查时，所采用的细菌、霉菌及酵母菌计数方法和控制菌检查方法是否适合于该样品的微生物限度检查。 二、样品：妇科止带胶囊 批号20141002规格：每粒装0.46g 生产企业：贵州宏奇药业有限公司 供样单位：贵州宏奇药业有限公司 三、培养基 胆盐乳糖增菌液 批号：140309 玫瑰红钠琼脂 批号：140511 营养琼脂 批号：140211 营养肉汤 批号：140509 改良马丁 批号：131240 改良马丁琼脂 批号：140311 麦康凯琼脂（MacC） 批号：140206 胆盐硫乳琼脂培养基 批号：140312 四硫磺酸钠亮绿培养基 批号：140425 （以上培养基均由上海博微生物科技有限公司提供） 四、菌种 枯草芽孢杆菌 (Bacillus subtilis) [CMCC(B)63501] 金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus) [CMCC(B) 26003] 大肠埃希菌（Escherichia coli）[CMCC(B) 44102] 白色念珠菌 (Candida albicans) [CMCC(F) 98001] 黑曲霉菌 (Aspergillus nier) [CMCC(F)98003] 沙门氏菌 [CMCC(B)50094] （以上菌种由贵州省药品检验所提供） 五、试验所用仪器37℃培养18~24小时的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的肉汤培养物1ml，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至10-5 ~10-7，约为50～100cfu/ml的菌液,做活菌计数备用。 2、取经25~