东山湾软珊瑚共附生可培养细菌的多样性和产酶活性鉴定.pdfVIP

第32卷第3期 应用海洋学学报 V01．32．No．3 2叭3年8月 JOurnaIOfApp|．edOceanOgraphy Aug，，2013 东山湾软珊瑚共附生可培养细菌的 多样性和产酶活性鉴定 刘 阳l’2，赖其良2，陈华2，王建宁2，余志伟2，王丽萍2，邵宗泽2 (1．华中农业大学生命科学技术学院，湖北武汉430070； (2．国家海洋局第三海洋研究所、海洋生物遗传资源重点实验室，福建厦门361005) 摘要：利用稀释10倍的2216E培养基，采用涂布平板法分离软珊瑚共附生可培养细菌，然后提取各 菌株基因组DNA，扩增其16SrRNA基因并测序，通过比对分析确定菌株的分类地位，进而研究东 山湾软珊瑚共附生可培养细菌的多样性；同时测定各菌株产淀粉酶、蛋白酶和酯酶能力，进而获得 具有产酶活性的细菌资源．结果表明：一共分离到244株细菌，剔除重复后共获得128株不同的细 C革兰氏阳性菌，22株)和拟杆菌纲(3株)4大类群，共包含44个属，72个种，多样性十分丰富，其 中有9株细菌的16srRNA基因相似度低于98．0％，为分离到的潜在新种．同时，128株细菌3种酶 活检测的结果表明：16株细菌具有淀粉酶活性，73株细菌具有酯酶活性，23株细菌具有蛋白酶活 性，其中15株细菌同时具有3种酶活性．本研究首次报道了东山湾软珊瑚共附生可培养细菌丰富 的多样性，同时获得了具有良好的产酶特性菌株资源，具有进一步研究和应用价值． 关键词：海洋生物学；软珊瑚；共附生细菌；多样性；酶活鉴定 DOI：lO．3969／J．ISSN2013．03．0】3 中图分类号：Fr735 文献标识码：A 21世纪是生物的世纪，同时也是海洋的世纪， 瑚共附生微生物资源的开发和利用已得到世界各国 因此我们必须要抓住历史机遇，开发海洋资源、扩大 的关注． 海洋产业、发展海洋经济|11．而具有“海洋热带雨 为了更加高效的开发和利用这些资源，珊瑚共 林”之称的珊瑚生态系统，蕴含着丰富的生物资源． 附生微生物的研究显得尤为重要．目前，关于珊瑚的 我国的珊瑚主要分布于南海诸岛、海南岛、台湾岛及 共附生微生物的研究很多，但是这些研究主要集中 澎湖列岛的沿岸，其中，西沙和南沙海域是我国最主 在珊瑚共附生真菌的多样性及其抗菌活性物质等方 要的珊瑚礁区．而东山岛位于福建省南部，面积223 面。5…，而珊瑚的共附生细菌的研究较少．因此，本 km2，四周群岛环绕，因此大部分区域为浅水区，水 研究以东山湾的珊瑚为研究对象，旨在探索珊瑚共 流稳定，光照充足；同时，东山岛靠近北回归线，地处 附生细菌的多样性，分离和鉴定具有应用潜力的产 热带和亚热带交界处，因此水温适宜2．这样独特 酶共附生细菌，从而为东山湾珊瑚共附生细菌资源 的自然条件使东山岛附近海域形成了多样的珊瑚生 的开发和利用提供理论基础． 态系统-，它也成为了众多学者研究的热点区域． 1材料与方法 珊瑚作为珊瑚生态系统的重要载体，由珊瑚虫、 共附生藻类和细菌等组成．因此，珊瑚黏液层、骨架 1．1 材料 及其他组织共附生大量的微生物，其中包括：藻类、 1．1．1 样品的采集 采集地点为福建省漳州市东 原生动物、细菌、真菌、古细菌和病毒等4．这些珊 山湾珊瑚礁生态保护区，采集时间为2009年8月 收稿日期：2012-02_05 基金项目：福建省自然科学基金资助项目(2009J0l177)；国家海洋局海洋公益性行业科研々项资助项f1(201005032) aclIin3@163．(Ⅲm 作者简介：刘阳(1986～)，男，硕』：研究生；E．『T1ail：liuh 通讯作者：邵0：泽，教授；EⅧail：s