基于生物素-亲和素系统的酶固定化及纳米金增效的研究.pdfVIP

吕 丰等：基于生物素 亲和素系统的酶固定化及纳米金增效的研究 - 基于生物素 亲和素系统的酶固定化及纳米金增效的研究! ! ! ! ! 吕 丰 许鑫华 许岳剑 韩松岩 陈 强 （天津大学材料科学与工程学院 天津 300072 ） ! （南开大学生命科学学院 天津 300071） 摘 要 应用石英晶体微天平（ ）研究了基于生物素 亲和素系统的葡萄糖氧化酶的 OCM - 固定化，探讨了纳米金修饰OCM 金基片对酶固定化的一系列过程的影响。在本实验条件 下，利用生物素-亲和素系统能较好地固定化葡萄糖氧化酶，经过纳米金颗粒修饰的OCM 基片对酶的吸附量比未经修饰的基片可提高 倍以上。 1 关键词 生物素 亲和素，纳米金，酶固定化， - OCM 生物素 亲和素系统和纳米金对固定化酶的作用，其 - 0 引 言 在固定化酶以及应用到生物传感器方面有较大的潜 力。 酶电极的酶固定化方法很多，常用的方法有物 理吸附、共价结合、包埋等。但在酶的固定化过程中 1 实验部分 经常出现酶的活性降低或稳定性不好等问题，这些 问题与酶固定化过程中酶的构象、酶层以及酶与支 . 试剂与仪器 ［］ 撑物之间的联结有关 1 。生物素 亲和素（ 葡萄糖氧化酶（ ， ，）、生物 - biotin-a- EC 1. 1. 3 . 4 340unit/ mg vidin）系统的应用开辟了一类新的酶的固定化技术。 素（ ）、亲和素（ ）、盐酸 乙基 （ 二甲基 biotin avidin 1- -3- 3- 由于亲和素和生物素间高度的特异性结合力、桥联 氨基）碳二亚胺（ ）、 羟基琥珀酰亚胺（ ）、， EDC N- NHS 1 作用以及多级放大作用，且多数的蛋白质、酶、抗体、 己二硫醇，硫辛酸购自 公司，其它试剂均 6- a- Sigma DNA 等可以较容易地生物素化，生物素化后并不降 为分析纯。所有实验用水均为二次蒸馏水；石英晶 低其活性，使其在生物学、分子生物学、生物化学、临 体微天平（ ）（ ， ）；透射电子显微镜 OCM OCA917 EGSG