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同位素示踪法(isotopic tracer method )是利用放射性核素作为示踪剂对研究对象进行标记的
微量分析方法,示踪实验的创建者是 Hevesy 。Hevesy 于 1923 年首先用天然放射性 212Pb
研究铅盐在豆科植物内的分布和转移。继后Jolit 和Curie 于1934 年发现了人工放射性,以
及其后生产方法的建立(加速器、反应堆等),为放射性同位素示踪法的更快的发展和广泛
应用提供了基本的条件和有力的保障。
一、同位素示踪法基本原理和特点
同位素示踪所利用的放射性核素(或稳定性核素)及它们的化合物,与自然界存在的相
应普通元素及其化合物之间的化学性质和生物学性质是相同的,只是具有不同的核物理性质。
因此,就可以用同位素作为一种标记,制成含有同位素的标记化合物(如标记食物,药物和
代谢物质等)代替相应的非标记化合物。利用放射性同位素不断地放出特征射线的核物理性
质,就可以用核探测器随时追踪它在体内或体外的位置、数量及其转变等,稳定性同位素虽
然不释放射线,但可以利用它与普通相应同位素的质量之差,通过质谱仪,气相层析仪,核
磁共振等质量分析仪器来测定。放射性同位素和稳定性同位素都可作为示踪剂(tracer ),
但是,稳定性同位素作为示踪剂其灵敏度较低,可获得的种类少,价格较昂贵,其应用范围
受到限制;而用放射性同位素作为示踪剂不仅灵敏度,测量方法简便易行,能准确地定量,
准确地定位及符合所研究对象的生理条件等特点:
1.灵敏度高
放射性示踪法可测到10-14-10-18 克水平,即可以从1015 个非放射性原子中检出一个
放射性原子。它比目前较敏感的重量分析天平要敏感108-107 倍,而迄今最准确的化学分析
法很难测定到10-12 克水平。
2.方法简便
放射性测定不受其它非放射性物质的干扰,可以省略许多复杂的物质分离步骤,体内示
踪时,可以利用某些放射性同位素释放出穿透力强的r 射线,在体外测量而获得结果,这就
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大大简化了实验过程,做到非破坏性分析,随着液体闪烁计数的发展, C 和 H 等发射软β
射线的放射性同位素在医学及生物学实验中得到越来越广泛的应用。
3.定位定量准确
放射性同位素示踪法能准确定量地测定代谢物质的转移和转变,与某些形态学技术相结
合(如病理组织切片技术,电子显微镜技术等),可以确定放射性示踪剂在组织器官中的定
量分布,并且对组织器官的定位准确度可达细胞水平、亚细胞水平乃至分子水平。
4.符合生理条件
在放射性同位素实验中,所引用的放射性标记化合物的化学量是极微量的,它对体内原
有的相应物质的重量改变是微不足道的,体内生理过程仍保持正常的平衡状态,获得的分析
结果符合生理条件,更能反映客观存在的事物本质。放射性同位素示踪法的优点如上所述,
但也存在一些缺陷,如从事放射性同位素工作的人员要受一定的专门训练,要具备相应的安
全防护措施和条件,在目前个别元素(如氧、氮等)还没有合适的放射性同位素等等。在作
示踪实验时,还必须注意到示踪剂的同位素效应和放射效应问题。所谓同位素效应是指放射
性同位素(或是稳定性同位素)与相应的普通元素之间存在着化学性质上的微小差异所引起
的个别性质上的明显区别,对于轻元素而言,同位素效应比较严重。因为同位素之间的质量
判别是倍增的,如3H 质量是 1H 的三倍,2H 是 1H 的两倍,当用氚水(3H2O )作示踪剂
时,它在普通H2O 中的含量不能过大,否则会使水的物理常数、对细胞膜的渗透及细胞质
粘性等都会发生改变。但在一般的示踪实验中,由同位素效应引起的误差,常在实验误差内,
可忽略不计。放射性同位素释放的射线利于追踪测量,但射线对生物体的作用达到一定剂量
时,会改变机体的生理状态,这就是放射性同位素的辐射效应,因此放射性同位素的用量应
小于安全剂量,严格控制在生物机体所能允许的范
围之内,以免实验对象受辐射损伤,而得错误的结果。
二、示踪实验的设计原则
实验准备阶段
正式实验阶段
放射性去污染和放射性废物处理
设计一个放射性同位素的示踪实验应从实验的目的性,实验所具备的条件和对放射性的
防护水平三方面着手考虑。原则上必须从两个主要方面来设计放射性示踪实验:一是必须寻
求有效的、可重复的测定放射性强度的条件,二是必须选择一个合适的比活度λqδ (单位是
原子/时间/分子,dpm/mol 或 ci/mol )。其中,λ=-d N’dt/ N’为该处放射性原子核的衰
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