用高效液相渗透凝胶色谱法法分析动物皮肤和兔关节液中透明质酸.docVIP

文献1：ANALYSIS BY HIGH-PERFORMANCE GEL PERMEATION CHROMATOGRAPHY OF HYALURONIC ACID IN ANIMAL SKINS AND RABBIT SYNOVIAL FLUID 用高效液相渗透凝胶色谱法法分析动物皮肤和兔关节液中透明质酸 文献来源：正式出版物Journal of Chromatography A Volume 435, 1988, Pages 335–342 文献摘要： 作者描述了用两根色谱柱同时测定生物样品中透明质酸的浓度和分子量。作者在开头的介绍中这样说： 我们曾经用Shodex OHpak B-806成功把HA跟其他多糖分离，并且测定了它的分子量。但是，要测定HA的浓度需要HA跟其他物质完全分离，因此我们用两根柱子（Shodex OHpak 和B-806 and B-805）合用来达到更高的分离度和覆盖不同的分子量范围。 色谱条件 equipped with two Shodex OHpak columns (Showa Denko, Tokyo,Japan), B-806 and B-805 (50 cm x 8 mm I.D.), a guard column of Shodex OHpak800P (50 mm x 6 mm I.D.) The eluent was 0.02 M sodium chloride，The flow-rate was 0.5 ml/min. 对照品 作者自制不同分子量的HA（过特定的柱子或者透析），HA的浓度是作者用咔唑法测糖醛酸的方法测定。 标准曲线的制备 作者用不同分子量的自制HA做曲线，结果如下： 1：DNA,M=3千1百万；2 ：纯化的HA，M=1百万；3：纯化的HA，M=61万；4：纯化的HA，M=33.5万；5：纯化的HA，M=25.7万； 结果表明：在分子量60万和20万之间是成线性关系的； 作者同时进了Pullulan （GPC葡聚糖标准品，Pullulan分子量跟实际的分子量有差别，说明HA的标准曲线应该用HA标准品校正。 结论 这个结果证明了可用此方法同时测定生物样品中HA的分子量和浓度。然而，此色谱技术对于大于1百万分子量的HA却不能提供精确的分子量。 文献2 Analysis of Over 15 Million Dalton Polymers by Aqueous SEC Method 用水性凝胶渗透色谱法分析超过1500万分子量的多聚体 文献来源：SHODEX公司网站下载 文献摘要：这篇文章主要是SHODEX公司介绍用Shodex? OHpak SB-807 HQ色谱柱来分析高分子量HA（大于100万），主要介绍了两个试验： 分别用SB-807柱子和SB-806柱子分析了Mw=550万的HA,结果如下（绿色曲线为806，红色为807： 结果：用806峰形不对称（拖尾），作者分析原因为HA超出了806的排阻限度，高分子量的HA在同一时间流出的结果；807峰形对称，可以准确的表示出样品的分子量分布，同时，807的大颗粒可以保护潜在的剪切降解。 二．用SB-807分析了三种来源的HA（分子量大于100万），结果如下： 结果：所有的峰形都是对称的，表明即使最大分子量的HA也没有超出 SB-807的排阻限度。